СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ПРОЦЕССОВ ПРОЛИФЕРАЦИИ, АПОПТОЗА И МЕЖКЛЕТОЧНОЙ АДГЕЗИИ ПРИ ЦЕНТРАЛЬНОМ И ПЕРИФЕРИЧЕСКОМ ПЛОСКОКЛЕТОЧНОМ РАКЕ ЛЕГКОГО.

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ПРОЦЕССОВ ПРОЛИФЕРАЦИИ, АПОПТОЗА И МЕЖКЛЕТОЧНОЙ АДГЕЗИИ ПРИ ЦЕНТРАЛЬНОМ И ПЕРИФЕРИЧЕСКОМ ПЛОСКОКЛЕТОЧНОМ РАКЕ ЛЕГКОГО.

Ключевые слова: плоскоклеточный рак легкого, пролиферативная активность, апоптоз, межклеточная адгезия.

Исследованы иммуногистохимические маркеры пролифе-ративной активности (Ki67 и топоизомераза IIa), апоптоза (р53) и межклеточной адгезии (Е-кадгерин) у 212 больных плоскоклеточным раком легкого. Выявлено различие био­логических свойств центральных и периферических опу­холей, заключающееся в характере взаимодействия между изучаемыми маркерами. При центральном раке уровень межклеточной адгезии коррелировал с экспрессией мар­керов пролиферативной активности и апоптоза, тогда

как при периферическом раке подобная зависимость не прослеживается. При центральном раке без метастазов в лимфатические узлы уровень экспрессии Е-кадгерина был связан только с экспрессией Ki67, а при поражении лимфа­тических узлов - с топоизомеразой Па и р53 .

Необходимость индивидуализировать подходы к ле­чению рака легкого является актуальной проблемой онкологии. Поиск дополнительных прогностических факторов предполагает изучение различных клини­ческих, морфологических и молекулярно-биологических маркеров, характеризующих опухоль как систему. Известны клинические различия между центральным и периферическим плоскоклеточным раком легкого (ПРЛ). Обсуждается вопрос о различии их метастати­ческих характеристик, однако биологические особен­ности этих новообразований на морфогенетическом уровне изучены недостаточно [1, 2, 4]. Наиболее важ­ными факторами, определяющими агрессивность рака легкого, считаются маркеры пролиферации, апоптоза и межклеточной адгезии [3-7]. В настоящей работе проведено сравнение уровней экспрессии вышеука­занных маркеров и их взаимосвязей при центральном и периферическом ПРЛ.

Материал и методы. Использованы образцы пер­вичных опухолей от 200 мужчин и 12 женщин в возрасте от 42 до 77 лет. В 121 случае был диагностирован периферический, в 91 случае- центральный ПРЛ. После операций изучались серийные криостатные срезы новообразований с использованием первичных моноклональных антител и вторичной системы детек­ции фирмы Novocastra. Применялись маркеры пролиферативной активности (Ki67 и топоизомераза IIa),апоптоза (р53) и межклеточной адгезии (супрессор ин-вазивности Е-кадгерин). Оценка уровней экспрессии Ki67, топоизомеразы Па и p53 проведены методом оп­ределения соотношения обозначенным ДНК-связыва-ющим красителем (DAB) ядер к неокрашенным из рас­чета на 1000 ядер опухолевых клеток в 10 полях зрения и выражалась в процентах. Экспрессия Е-кадгерина оценена полуколичественно: окраска менее 5% опухо­левых мембран - в 1 балл, более 5% - в 2 балла, менее 50% - в 4 балла и более 50% - в 6 баллов. Статистичес­кий анализ проведен в пакете программ Statistica 6.0.

Сравнение размеров первичной опухоли и иммуногистохимических показателей выполнено с использовани­ем критерия Манна-Уитни. Иммуногистохимические исследования выполнены на базе Института повыше­ния квалификации специалистов здравоохранения, г. Хабаровск (ректор - проф. С.Ш. Сулейманов).

Полученные результаты и их обсуждение. Уровни экспрессии Ki67, топоизомеразы Па, р53 и Е-кадгери-на при центральном и периферическом ПРЛ оказались

одинаковыми, достоверные различия зарегистрирова­ны только для р53 - уровень его экспрессии в перифе­рических новообразованиях оказался в 1,32 раза выше.

При центральном раке имелась корреляция между уровнями экспрессии Ki67, топоизомеразы Па и р53 с экспрессией Е-кадгерина - т.е. по мере увеличения

количества пролиферирующих клеток степень меж­клеточной адгезии повышалась. При периферических опухолях экспрессия Е-кадгерина не была связана ни с одним из изучаемых маркеров. Коэффициенты пар­ной корреляции иммуногистохимических маркеров при центральном и периферическом раке различались достоверно (табл. 1).

Также проведено сравнение коэффициентов кор­реляции экспрессии изучаемых маркеров в подгруппах с наличием или отсутствием поражения регионарных лимфоузлов (табл. 2).

Средней силы прямая связь уровней экспрессии Ki67 и Е-кадгерина выявле­на только при центральном раке легкого, т.е. повыше­ние пролиферативной ак­тивности опухоли сопро­вождалось усилением меж­клеточной  адгезии. При периферических опухолях

данная зависимость отсутс­твовала. При центральном ПРЛ с метастазами в лимфатические узлы обнаружена корреляция высокого уровня экспрессии Е-кадгерина с гиперэкспрессией р53 и топоизомеразой Па. При пери­ферическом ПРЛ указанные взаимосвязи не выявлены.

Полученные результаты показывают, что взаимо­действие процессов пролиферации, апоптоза и меж­клеточной адгезии оказывают различное влияние на реализацию метастатического потенциала при основных клинико-анатомических формах плоско­клеточного рака легкого. Изученные иммуногисто-химические маркеры являются вспомогательными характеристиками агрессивности опухоли. Их ис­пользование с учетом клинико-анатомической фор­мы новообразования целесообразно для выделения

подгруппы больных с повышенным риском прогрессирования рака в группах с «благоприятным» прогнозом.

Таким образом, центральные и периферические раки легкого различаются по биологическим свойс­твам, причем это различие проявляется не столько в разных уровнях экспрессии маркеров пролиферации, апоптоза и межклеточной адгезии, сколько в харак­тере и силе взаимодействия между ними. При цент­ральном раке уровень межклеточной адгезии корре­лирует с экспрессией маркеров пролиферативной ак­тивности и апоптоза, тогда как при периферическом раке подобная зависимость не прослеживается. При центральном ПРЛ без метастазов в лимфатические узлы уровень экспрессии Е-кадгерина связан только с экспрессией Ki67, а при поражении лимфатических узлов возникает взаимосвязь уровней экспрессии Е-кадгерина, топоизомеразы Па и р53.

Литература

1. Лактионов К.К. Плоскоклеточный рак легкого: дис. ... д-ра мед. наук. М.: РОНЦим. Н.Н. Блохина, 2004. 260 с.

2. Лактионов К.К., Давыдов М.И., Полоцкий Б.Е. и др. Про­гностические и предсказывающие факторы у больных не-мелкоклеточным раком легкого //Практ. онкол. 2006. Т. 7, №3. С.145-153.

Таблица 1

Сравнение коэффициентов корреляции исследуемых параметров при различных формах ПРЛ

Сравнение коэффициентов корреляции уровней экспрессии в подгруппах N₀ и N+

Таблица2

при ПРЛ

3. Grossi F., Loprevite M., Chiaramondia M. et al. Prognostic significance ofK-ras, p53, bcl-2, PCNA, CD34 in radically re­sected non-small cell lung cancers//Eur. J. Cancer. 2003. Vol. 39, No. 9. P. 1242-1250.

4. Lee Y.C., Wu C. T, Chen C.S. et al. The significance ofE-cad-herin and alpha-, beta-, and gamma-catenin expression in sur­gically treated non-small cell lung cancers of3 cm or less in size //J. Thor. Card. Surg. - 2002. Vol. 123, No. 3. P. 502-507.

5. Liu D, Huang С L, Kameyama К etal. Topoisomerase Ilalpha gene expression is regulated by thep53 tumor suppressor gene in nonsmall cell lung carcinoma patients// Cancer. 2002. Vol. 94, No. 8. P. 2239-2247.

6. Nguyen V.N, Mirejovsky P., Melinova L. et al. Expression of cyclin D1, Ki-67and PCNA in non-small cell lung cancer: prog­nostic significance and comparison with p53 and bcl-2//Acta

Histochem. 2000. Vol. 102, No. 3. P. 323-338.

7. TamuraM, Ohta Y, Tsunezuuka Y. etal. Prognosticsignificanceof dyscadherin expression inpatients with non-smallcelllungcancer// J. Thorac. CardiovascSurgery. 2005. Vol. 130, No. 3. P. 740-745.